genaxxon M3009.0250说明书
产品信息“SNP Pol DNA Polymerase”
SNP Pol DNA聚合酶,用于简便,可靠和快速的等位基因特异性鉴别,例如。CRISPR / Cas9点突变,用于检测错误的CRISPR / Cas9产物,或验证测序结果。SNP Pol DNA聚合酶区分高度特异性,是否存在引物 - 模板复合物的错配。错配(点突变)必须位于引物的3'末端。因此,突变等位基因可以与野生型等位基因*区分 - 无需测序,因为聚合酶在错配的情况下不会放大。
只需将您的引物置于假定的点突变上(重要:点突变必须位于3'末端),聚合酶将检测到该区域的错配,几乎100%准确:如果模板碱基与3'末端互补引物显示突变而引物不显示,不会发生扩增 - 在短时间内100%确定!
因此,SNP Pol DNA聚合酶可以容易地,时间和成本有效地用于点突变的筛选。
变体SNP PolTaq DNA聚合酶具有5'-3'核酸酶活性,因此可用于特定的水解探针,例如Taqman探针或分子信标。
测试样品以*出售!德国境内没有运输费用。测试样品价格将在产品的个正式订单中退还。
描述
SNP Pol DNA聚合酶>(Hi gh Di鉴定单核苷酸)是一种高选择性的DNA聚合酶。它专门针对需要高鉴别率的等位基因特异性鉴别而开发:例如等位基因特异性PCR(ASA; AS-PCR),等位基因特异性引物延伸(AS-PEX),SNP分析,基因分型或甲基化特异性PCR(MSP)。许多其他DNA聚合酶耐受错配的引物 - 模板复合物,因此不适合。另一方面,SNP Pol DNA聚合酶特异性地区分这些(高鉴别度)并仅提供具有*匹配的引物对的PCR产物!通过两个等位基因之间的等位基因特异性PCR,Genaxxon SNP Pol和SNP PolTaq DNA聚合酶的差异高达100%,并且在简单的qPCR之后,给出关于哪个等位基因存在的清楚结果。从而,
等位基因特异性PCR可用于量化野生型序列的库或背景中的突变率。由NGS确定的突变频率的验证 也可以通过等位基因特异性PCR和SNP Pol DNA聚合酶来验证。SNP PolTaq DNA聚合酶非常适合分析 液体活检 样品。使用SNP PolTaq,可以很好地分析和量化癌症突变的存在和频率。
图片如下:应用说明SNP Pol DNA Polymerase
我们建议设计具有短扩增子长度(约60-200 bp)的引物以获得良结果,但也可以使用更长的扩增子长度。如果扩增子长> 500 bp,可能需要添加额外的镁(+0.5-1.5mM)。
SNP Pol DNA聚合酶(M3009> 或 M3061>)可与非特异性荧光染料(例如Genaxxon的 Green DNA Dye> 或SybrGreen®)一起用于实时PCR。当使用特异性PCR探针时,可以仅使用SNP PolTaq DNA聚合酶,因为只有这些具有5'-3'外切核酸酶活性。
我们的高质量dNTP如Set(M3015.4100)> 或 Mix(M3016.1010)> 或我们的 DNA Ladders> 和我们有利的 标准琼脂糖(M3044)> 我们可以为您的PCR提供其他产品。
SNP Pol DNA和SNP Pol DNA聚合酶的应用领域
- 点突变的监测,验证和检测
- 正确或错误的CRISPR / Cas9产物
的鉴定
- 测序结果的验证/验证- 突变的定量(例如NGS结果)
- SNP检测等位基因特异性扩增(ASA)/等位基因特异性PCR
- 亚硫酸氢盐处理DNA后的甲基化特异性PCR(MSP)(CpG甲基化侧)
- HLA基因分型
- 微量测序
- 水解探针实时PCR
- 实时多重PCR
- 秀丽隐杆线虫中的DamID-seq数据。
作为ChIP的替代方案,近显示通过测序(DamID-seq)鉴定DNA腺嘌呤甲基转移酶能够表征单个哺乳动物细胞中的结合位点。另外,通过以受控方式在组织特异性启动子下表达Dam融合蛋白,可以实现DamID用于细胞类型特异性分析。在本报告中,我们提供了一个用户友好的管道来分析秀丽隐杆线虫中的DamID-seq数据。
规格:
SNP Pol DNA聚合酶以5 U /μL溶液形式提供。它配有优化的10倍反应缓冲液。
SNP Pol DNA聚合酶不显示5'-3'外切核酸酶活性!不适用于与例如TaqMan TM探针的水解探针一起使用。
- 点突变的监测,验证和检测 - 正确或错误的CRISPR / Cas9产物的鉴定 - 测序结果的验证/验证 - 突变的定量(例如NGS结果) - 通过等位基因特异性扩增(ASA)/等位基因的SNP检测 - 特异性PCR - 亚硫酸氢盐处理DNA后的甲基化特异性PCR(MSP) - HLA基因分型 - 微量测序 - 实时PCR(无水解探针;使用SNP PolTaq) - 实时多重PCR
REC。来自大肠杆菌
SNP聚合酶是一种高选择性的DNA聚合酶变异体。它已被选定用于鉴别程度较高的检测。 例如在等位基因特异性PCRS或甲基化特异性PCRS中。许多dna聚合酶能耐受不匹配的引物-模板复合物,而snp pol dna聚合酶则能有效地鉴别Th。 OSE只在*匹配引物对的情况下产生特定的扩增。这使得SnPol DNA聚合酶在SNP检测、HLA基因分型或单个CpG分析中非常有用。 加注地点。
SNP Pol DNA聚合酶能有效地区分3‘端不匹配的引物.3‘位错配引物是识别SNPs的要求. 如果突变/错配位于引物的另一个位置,SNP POL和SNP PolTaq聚合酶将像“正常”Taq聚合酶一样工作。
该工程聚合酶也可作为SNP PolTaq DNA聚合酶版本,具有5‘-3’-核酸酶活性,因此可用于基于水解探针的检测(Taqman探针,molec)
商品概述
浓度:5单位/升
底物类似物:dNTP,ddNTP,荧光dNTP/ddNTP
延伸率:1 kb/min。在72°C
半衰期:20分钟。95°C,60 min。在94°C
5‘-3’外核酶活性:SNP POL聚合酶NO/SNP PolTaq聚合酶YES)
3‘-5’外核酶活性:NO
核酸酶污染:否
蛋白酶污染:否
单位定义
SNP POL/SNP Poltaq dna-Polymerase的一个单位定义为在72℃下,在72℃下,将10 nmol的dntp酶在30分钟内加入到酸不溶性组分中的酶量。 .
质量管理
PCR活性:SNP POL和SNP PolTaq DNA聚合酶PCR检测HeLa基因组DNA中的基因组SNP(Rs 72921001)。PCR产物随后在 2.5%琼脂糖凝胶。用etSNP溴化Polum染色法在匹配引物的正确扩增长度为109 bp的条件下,观察到一种特异的产物。在不匹配引物的情况下,不生成产物。 在50个周期后可见。
DNA聚合酶活性:用人工DNA模板和DNA引物监测SNP POL和SNP PolTaq DNA聚合酶活性,并将其调整为特定的DNA聚合酶活性。
适用,应用,运用
·SNP-等位基因特异性扩增(ASA)/等位基因特异性PCR检测
甲基化特异性PCR(MSP)
·HLA基因分型
·多重PCR
稳定(性),稳固
Genaxxon生物科学SNP POL和SNP PolTaq DNA-聚合酶在湿冰上运输,但在RT(15°C~25°C)下保持活性至少2周。
SNP POL和SNP PolTaq DNA聚合酶(包括缓冲器和试剂)应在收到-20°C时立即储存,在这些条件下储存并正确处理,这些产品可以 保持至少到有效期(见管标签),而不显示任何性能下降。Genaxxon生物科学SNP POL和SNP Poltaq DNA聚合酶也可在2°C-8保存。 c多3个月。